Western Blot (蛋白印跡)
Western Blot(蛋白印跡)簡介
Western blot,也稱Western、Western blotting、Western印跡、蛋白免疫印跡,是檢測目的蛋白常用而且重要的方法之一。基本原理是通過將電泳分離后的細(xì)胞或組織總蛋白從凝膠轉(zhuǎn)移到固相支持物NC膜或PVDF膜上,然后用特異性抗體檢測某特定抗原,后通過分析底物化學(xué)發(fā)光(ECL)顯色底片上曝光的位置和深度獲得特定蛋白在所分析的細(xì)胞或組織中表達(dá)情況的信息。
Western Blot是的一種常用的蛋白質(zhì)檢測技術(shù),現(xiàn)已廣泛應(yīng)用于基因在蛋白水平的表達(dá)研究、抗體活性檢測和疾病早期診斷等多個方面,具有高分辨率和固相免疫測定的高特異性和敏感性,常用于鑒定某種蛋白,并能對蛋白進(jìn)行定性和半定量分析。
試驗(yàn)流程
1、細(xì)胞蛋白提取和定量。
2、10-15%的SDS-PAGE變性聚丙烯酰胺凝膠電泳。
3、蛋白轉(zhuǎn)膜(PVDF膜)。
4、蛋白封閉 (5%脫脂奶粉)。
5、一抗孵育。
6、二抗孵育。
7、暗室顯色(ECL),洗片等。
8、數(shù)據(jù)分析。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果示例
客戶提供
1、實(shí)驗(yàn)信息,包括抗體類型,蛋白分子質(zhì)量和性質(zhì)等。如果需要培養(yǎng)細(xì)胞,并進(jìn)行藥物處理,需要提供細(xì)胞類型和化合物。
2、實(shí)驗(yàn)結(jié)果要求等。
我們的優(yōu)勢
1、多種抗體供實(shí)驗(yàn)需要。
2、專業(yè)的操作人員。
3、高規(guī)格實(shí)驗(yàn)室。
4、數(shù)據(jù)結(jié)果交付周期快。
服務(wù)流程
1、提交項(xiàng)目課題相關(guān)需求和資料。
2、與我們的專業(yè)技術(shù)團(tuán)隊(duì)討論項(xiàng)目細(xì)節(jié)。
3、根據(jù)討論后的意見對實(shí)驗(yàn)方案進(jìn)行修改。
4、雙方均滿意并達(dá)成一致,簽訂技術(shù)服務(wù)合同。
5、開展實(shí)驗(yàn),按期完成合同規(guī)定的內(nèi)容。
6、結(jié)題,提供實(shí)驗(yàn)原始結(jié)果和分析結(jié)果、實(shí)驗(yàn)流程、實(shí)驗(yàn)條件等等。
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