美國R&D Systems試劑盒其基本方法是將已知的抗原或者抗體吸附在固相載體表面,并保持其免疫活性。然后抗原或抗體與某種酶連接成酶標(biāo)抗原或抗體,這種酶標(biāo)抗原或抗體既保留其免疫活性,美國R&D Systems試劑盒盒又保留酶的活性。在測定時,把受檢標(biāo)本(測定其中的抗體或抗原)和酶標(biāo)抗原或抗體按不同與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。
檢驗方法是產(chǎn)品說明書中核心的一部份,用于的指導(dǎo)使用者進行使用操作,一般包括如下幾個部份:
1.試劑配制:各試劑組分的稀釋、混合及其他必要的程序。
2.必須滿足的試驗條件:如pH值、溫度、每一步試驗所需的時間、波長、終反應(yīng)產(chǎn)物的穩(wěn)定性等。試驗過程中必須注意的事項。
3.校準(zhǔn)程序(如果需要):校準(zhǔn)品的準(zhǔn)備和使用,校準(zhǔn)曲線的繪制方法。
4.質(zhì)量控制程序:質(zhì)控品的使用、質(zhì)量控制方法。
5.試驗結(jié)果的計算或讀取,包括對每個系數(shù)及對每個計算步驟的解釋。
隨著臨床檢驗技術(shù)的發(fā)展,上述內(nèi)容大多已經(jīng)集成到儀器設(shè)備中,通過自動化、標(biāo)準(zhǔn)化的儀器操作,來大化的降低誤差,提高結(jié)果準(zhǔn)確性。
美國R&D Systems試劑盒需要遵循的3個要點
1、抗原或抗體能吸附于固相載體表面,并保持其免疫學(xué)活性;
2、抗原或抗體可通過共價鍵與酶連接形成酶結(jié)合物,而此種酶結(jié)合物仍能保持其免疫學(xué)和酶學(xué)活性;
3、酶結(jié)合物與相應(yīng)抗原或抗體結(jié)合后,可根據(jù)加入底物的顏色反應(yīng)來判定是否有免疫反應(yīng)的存在,而且顏色反應(yīng)的深淺是與樣本中相應(yīng)抗原或抗體的量成比例關(guān)系的,可根據(jù)已知濃度標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的吸光度值繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,并依此計算出未知樣品中抗體或抗原的濃度。